Análisis de la interacción entre KLF1 (Krüppel like factor 1) y Elongin C.

Abstract

KLF1 (Krüppel like factor 1), también conocido como EKLF (Erythroid Krüppel like factor) es un factor de transcripción de dedo de zinc (C2H2) específico de los eritrocitos que es esencial para la estructura y expresión adecuada de muchos genes eritroides implicados en la estructura y función de los glóbulos rojos, por ejemplo, del gen de la βglobina (1). KLF1 está regulado por interacciones con diversas proteínas, y en este estudio se ha trabajado con un nuevo candidato para la interacción proteína-proteína con KLF1, elongin C. Para estudiar la interacción de ambas proteínas lo primero que se hizo fue aislar el ADN plasmídico que contiene la secuencia de ADNc de elongin C. Después, se procedió a verificar la expresión de ADN en células eucariotas (células COS-7). Finalmente, se realizó una inmunoprecipitación con anticuerpos dirigidos contra la proteína Elo C para comprobar si había co-inmunoprecipitación de la otra proteína. Concluimos que existe una interacción directa entre KLF1 y elongin C, por lo que encontramos un nuevo factor que puede jugar un papel importante en el funcionamiento de KLF1, pudiendo tener relevancia en el proceso de maduración de los glóbulos rojos.

Erythroid Krüppel-like factor/Krüppel-like factor 1 (EKLF/KLF1) is an erythroid specific, C2H2 zinc finger transcription factor that is essential for the proper chromatin structure and expression of many erythroid genes involved in red blood cell structure and function e.g. β-globin. KLF1 is regulated by interactions with other proteins. From a mass spectrometer analysis, we have a new protein-protein interaction candidate for KLF1. It is elongin C. In order to study the interaction of KLF1 and elongin C, we first isolated the plasmid DNA containing the cDNA sequence of it. Then we verified that this cDNA is expressed in eukaryotic cells (COS 7 cells). Finally, in order to study the interaction, an immunoprecipitation with anti-Flag antibodies was carried out. We conclude that there is a direct interaction between KLF1 and elongin C, thus we found a new protein partner that may be important for the regulation of transcription factor KLF1.