Development of phenotypic screening method based on cell staining

Abstract

The traditional drug discovery process continues to be tedious, costly, time consuming and very risky. One of the hurdles that science faces is that reproducibility varies highly, or in some cases, the experimental results are non-reproducible at all. This drawback is even worse when considering drug development. Our research focuses on drug development evaluation at the early stages. We seek to revalue the traditional protocols in order to enrich our studies. Our hypothesis is that tissue-staining protocols can be adapted to monolayer cell culture to assess early pharmacological profiling of investigational compounds. The general objective is to adapt tissue-staining protocols to assess the early pharmacological profiling of investigational compounds. Some staining techniques such as eosin B, erythrosine and hematoxylin, alone or in combination with eosin B/ erythrosine, have been studied in previous works. In this work we will also explore the potential of other staining methods of interest, such as Sudan dyes for the visualization of lipids. In this work, we will explore the application of some of the existing cell and tissue staining protocols to our phenotypic drug discovery program directed at the discovery of small molecules for cancer treatment.

El desarrollo de fármacos es un proceso que continúa siendo tedioso, costoso, lento y muy arriesgado. Uno de los obstáculos a los que se enfrenta la ciencia es la falta de reproducibilidad de muchos de los resultados experimentales que se obtienen. Este inconveniente es aún peor cuando hablamos del desarrollo de fármacos, por lo que es de vital importancia ser muy rigurosos en las primeras fases de este proceso. Nuestra investigación se enfoca en la evaluación del desarrollo de fármacos en las etapas tempranas, y buscamos revalorizar los protocolos tradicionales conocidos para poder así enriquecer nuestros estudios. Nuestra hipótesis de partida es que los protocolos de tinción de tejidos se pueden adaptar al cultivo celular en monocapa para evaluar el perfil farmacológico de compuestos en investigación. El objetivo general es adaptar dichos protocolos para evaluar de forma preliminar el perfil farmacológico de compuestos en investigación. Algunas técnicas de tinción como la eosina B, la eritrosina y la hematoxilina, sola o en combinación con eosina B/eritrosina, ya han sido ensayadas en estudios anteriores. En este trabajo también exploraremos el potencial de otros métodos de tinción de interés, tales como tintes de Sudan para visualización de lípidos. La finalidad de este trabajo es explorar la aplicación de algunos de los métodos habituales de tinción de tejidos para nuestro programa de descubrimiento de fármacos orientados al tratamiento del cáncer.