Diseño de marcadores moleculares para la detección simultánea de Virus Herpes Simple 1 y 2 por PCR a tiempo real

Abstract

Los herpesvirus (familia Herpesviridae) constituyen un grupo grande y heterogéneo de virus capaces de provocar múltiples manifestaciones clínicas en el ser humano. En concreto, el Virus Herpes Simple 1 (VHS-1) y el Virus Herpes Simple 2 (VHS-2) se han relacionado tradicionalmente con el herpes labial y genital, respectivamente. Sin embargo, en las últimas décadas se ha detectado un cambio en este patrón, aumentando las infecciones genitales por VHS-1. Esto plantea la necesidad de contar con técnicas de diagnóstico que permitan diferenciar al VHS-1 y al VHS-2, con el fin de dar un pronóstico acertado y seleccionar el tratamiento adecuado en cada caso. En este trabajo se presenta una revisión bibliográfica donde se resalta la importancia de un diagnóstico diferencial para VHS-1 y VHS-2. Posteriormente, mediante el manejo de herramientas informáticas y el uso de bases de datos disponibles con la información genética de los virus, se analizan los parámetros necesarios para el diseño de marcadores moleculares, que permitan llevar a cabo una PCR (Reacción en Cadena de la Polimerasa) múltiple a tiempo real (multiplex-qPCR) con sondas tipo TaqMan®. El desarrollo de estos marcadores moleculares para la detección simultánea y diferencial de estos virus puede ser de utilidad en investigación primaria. Esto permitiría aumentar el número de muestras a analizar sin la necesidad de recurrir a kits comerciales que suelen encarecer este tipo de investigaciones.

Herpesviruses (Herpesviridae family) are a large and heterogeneous group of viruses responsible for causing a range of human diseases. Two species of this family, Herpes Simplex Virus 1 (HSV-1) and Herpes Simplex Virus 2 (HSV-2) have traditionally been associated with oral herpes and genital herpes, respectively. However, in recent decades, an increase in the incidence of genital herpes caused by HSV-1 has been noted. This evidence suggests the need for diagnostic techniques to specifically detect and distinguish between HSV-1 and HSV-2, intending to make a correct diagnosis and select the most appropriate treatment in each case. This dissertation emphasises the importance of differential diagnosis between both viruses through a systematic review. Next, several molecular markers are proposed for developing a real-time PCR (qPCR) with TaqMan® probes, using databases and informatics tools. Those molecular markers for the simultaneous detection of HSV-1 and HSV-2 could be useful in primary research, where the budget is usually limited. This would allow increasing the number of sample analyses, avoiding the use of expensive commercial diagnostic kits that often make research work more expensive.