Aislamiento de microARNs en muestras biológicas: potenciales biomarcadores epigenéticos de la COVID-19

Abstract

The SARS-CoV2 global pandemic had an impact on public health and has opened up new ways to study. In this context, microRNAs have emerged as potential biomarkers for disease detection and understanding pathogenesis. MicroRNAs are small molecules of genetic material with the ability to regulate gene expression. It has been shown that miRNAs may be altered in some diseases, including COVID-19. In the present study, miRNAs were isolated from saliva and serum samples of COVID-19 cases using a commercial kit. Then a real-time qPCR was performed to confirm the correct extraction of microRNAs by amplifying stable reference miRNAs. In addition, miRNAs profiles expression were analyzed in serum and saliva samples from patients with viral infection (17 subjects) and compared with a control group (9 subjects) without infection. The results showed an efficient extraction of microRNAs for all the serum samples analyzed and for the 70% of saliva. A differential expression of miR-1246, which has been associated with virus pathogenesis, in serum samples was observed between cases and controls. On the other hand, in saliva samples, a significant overexpression of miR3195, was observed in COVID-19 cases. In conclusion, miRNAs are efficiently isolated from serum, while an improvement in the collection method and isolation protocol must be made for their isolation in saliva samples. Our preliminary results suggest miR-1246 (in serum) and miR-3195 (in saliva) as potential diagnostic biomarkers of COVID-19 suggesting it’s possible role in the development of the disease.

La pandemia provocada por SARS-CoV-2 ha generado un impacto en salud pública y ha abierto nuevas ventanas de investigación. En este contexto, los microARNs han surgido como posibles biomarcadores para la detección de la enfermedad y la comprensión de la patogénesis. Los microARNs son pequeñas moléculas de material genético con capacidad para regular la expresión de genes de forma endógena. Se ha demostrado que los miARNs pueden estar alterados en diversas enfermedades, incluido el COVID-19. En el presente estudio, los microARN fueron aislados de muestras de saliva y suero en pacientes con COVID-19 utilizando un kit comercial. Después, se realizó la técnica de qPCR para confirmar la correcta extracción de los microARNs a través de la amplificación de miARNs estables. Además, se analizaron los perfiles de expresión de miARNs en muestras de suero y saliva de pacientes infectados (17 sujetos) en comparación con el grupo control (9 sujetos) sin infección. Los resultados revelaron una eficiente extracción de microARNs en todas las muestras de suero analizadas, y un 70% en muestras de saliva. En las muestras de suero, se encontraron diferencias significativas en la expresión de miR-1246, el cual se ha relacionado con la patogénesis viral. Por otro lado, en las muestras de saliva se observó una sobreexpresión significativa del miR-3195 en los casos de COVID-19. En conclusión, los microARNs se aíslan eficientemente en suero, mientras que en las muestras de saliva se debe mejorar el método de recolección y el protocolo de asilamiento. Los resultados preliminares sugieren los miR-1246 (en suero) y miR3195 (en saliva) como potenciales biomarcadores de COVID-19, dada su posible implicación en el desarrollo de la enfermedad.