Estudio de una estrategia terapéutica para el tratamiento de la enfermedad de Dent-1 utilizando líneas celulares humanas y el ratón knock-in Clcn5V523del

Abstract

La enfermedad de Dent-1 (DD1) es una tubulopatía proximal que se caracteriza principalmente por proteinuria de bajo peso molecular (PBPM), hipercalciuria, nefrolitiasis o nefrocalcinosis e insuficiencia renal crónica. La mayoría de los pacientes presenta mutaciones en el gen CLCN5 que codifica la proteína ClC-5, un intercambiador 2Cl-/H+ implicado en la endocitosis del túbulo proximal distal. A día de hoy, solo existen tratamientos dirigidos a disminuir los síntomas en pacientes. Una fracción de las mutaciones asociadas con esta enfermedad producen proteínas que son retenidas y degradadas en el retículo endoplasmático (RE) y las chaperonas químicas son moléculas capaces de revertir este defecto. Los objetivos desarrollados en esta tesis doctoral estuvieron centrados en determinar el efecto de mutaciones exónicas de CLCN5 en el procesamiento del pre-ARN mensajero, evaluar el efecto de mutaciones de clase 1 seleccionadas sobre la proteína ClC-5 en línea celular humana de riñón y evaluar el efecto de chaperonas químicas sobre el modelo celular y el modelo de ratón KI Clcn5V523del. En este trabajo se observó y concluyó que la proteína de fusión ClC-5 EGFP con las mutaciones de clase 1 p.(V523del), p.(G65R), p.(G462S) y p.(G466D) presentaron alteraciones en la expresión y localización, la cual es revertida para la mutación p.(V523del) como consecuencia de los tratamientos con TUDCA y 4-PBA, por lo que el desarrollo de modelos celulares de la enfermedad de Dent-1 es de gran utilidad para el ensayo pre-clínico de moléculas con potencial terapéutico de manera rápida y efectiva. Por otro lado, El tratamiento de nuestro modelo animal con el fármaco TUDCA disminuye la principal característica observada en DD1, la PBPM, así como la hiperfosfaturia e hipercalciuria, por lo que podría ser una potencial estrategia terapéutica para los pacientes con DD1 causada por proteína Clc-5 retenida en RE.