Implicación de TEP1, homólogo del gen supresor de tumores PTEN en humanos, en la regulación del transportador de nitrato de alta afinidad Ynt1 en levadura.
Author
Almeida Prieto, Brian![ULL authority ULL authority](/xmlui/themes/Mirage2/images/autoridades/autoridad.png)
Date
2018Abstract
The mammalian oncosupressor counteracts the phosphatidylinositol 3-kinase function
by dephosphorylating phosphatidylinositol (3,4,5)-trisphosphate (PIP3). PTEN
mutations alter PIP3 mediated-signaling, affecting cellular processes such as apoptosis,
metabolism or cell growth. Yeast PIP3 levels are undetectable; however, PTEN is a
ubiquitous gene in fungi. Our group has identified a PTEN orthologue in yeast
Hansenula polymorpha, named HpTep1, through a screening method to identify
mutants affected in nitrate assimilation. Previous works on Tep1 shows that TEP1
deleted strain rise PIP3 levels and is able to downregulate gene expression levels of
genes involved in nitrate assimilation. This strain has also lower nitrate reductase
activity. This work is on focus to study if Tep1 is altering the Ynt1 high affinity nitrate
transporter intracellular trafficking in H. polymorpha. Our results show that Δtep1 strain
was sensitive to toxic amino acid analogues and showed greater nitrite excretion levels,
thus Ynt1 could be accumulated on the plasma membrane. Analysis of Ynt1 levels by
Western-blotting confirms this hypothesis, suggesting that Tep1 could have an
important role in the intracellular trafficking regulation of transporters in yeast. El oncosupresor PTEN en mamíferos antagoniza la función de la fosfatidilinositol 3-
quinasa (PI3K), desfosforilando fosfatidilinositol (3,4,5)-trifosfosfato (PIP3).
Mutaciones en PTEN alteran la señalización mediada por este segundo mensajero,
afectando a procesos celulares como la apoptosis, el metabolismo o el crecimiento
celular. En levaduras los niveles de PIP3 son indetectables, sin embargo, el gen PTEN es
ubicuo en estos organismos. Nuestro grupo ha identificado un ortólogo de PTEN en la
levadura Hansenula polymorpha, HpTep1, a través de un rastreo de mutantes afectados
en la asimilación de nitrato. Los primeros trabajos realizados sobre Tep1 muestran que
la cepa delecionada en TEP1 aumenta los niveles de PIP3, tiene menores niveles de
expresión de los genes que regulan la vía de asimilación de nitrato y menor actividad
nitrato reductasa. Este trabajo ha sido llevado a cabo para determinar si Tep1 está
alterando el tráfico intracelular del transportador de nitrato de alta afinidad Ynt1 en H.
polymorpha. La cepa Δtep1 mostró sensibilidad a análogos tóxicos de aminoácidos y
mayores niveles de excreción de nitrito, resultados consistentes con la hipótesis de que
el transportador Ynt1 se tuviese acumulando en la membrana plasmática. El análisis de
los niveles de Ynt1 por Western-Blot confirmó esta hipótesis, sugiriendo que Tep1
tendría un papel importante en la regulación del tráfico intracelular de transportadores
en levadura.