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dc.contributor.advisorSiverio Expósito, José Manuel
dc.contributor.authorAlmeida Prieto, Brian es_ES
dc.contributor.otherMáster Universitario en Biotecnologíaes_ES
dc.date.accessioned2018-05-09T07:55:31Z
dc.date.available2018-05-09T07:55:31Z
dc.date.issued2018es_ES
dc.identifier.urihttp://riull.ull.es/xmlui/handle/915/7391
dc.description.abstractThe mammalian oncosupressor counteracts the phosphatidylinositol 3-kinase function by dephosphorylating phosphatidylinositol (3,4,5)-trisphosphate (PIP3). PTEN mutations alter PIP3 mediated-signaling, affecting cellular processes such as apoptosis, metabolism or cell growth. Yeast PIP3 levels are undetectable; however, PTEN is a ubiquitous gene in fungi. Our group has identified a PTEN orthologue in yeast Hansenula polymorpha, named HpTep1, through a screening method to identify mutants affected in nitrate assimilation. Previous works on Tep1 shows that TEP1 deleted strain rise PIP3 levels and is able to downregulate gene expression levels of genes involved in nitrate assimilation. This strain has also lower nitrate reductase activity. This work is on focus to study if Tep1 is altering the Ynt1 high affinity nitrate transporter intracellular trafficking in H. polymorpha. Our results show that Δtep1 strain was sensitive to toxic amino acid analogues and showed greater nitrite excretion levels, thus Ynt1 could be accumulated on the plasma membrane. Analysis of Ynt1 levels by Western-blotting confirms this hypothesis, suggesting that Tep1 could have an important role in the intracellular trafficking regulation of transporters in yeast.en
dc.description.abstractEl oncosupresor PTEN en mamíferos antagoniza la función de la fosfatidilinositol 3- quinasa (PI3K), desfosforilando fosfatidilinositol (3,4,5)-trifosfosfato (PIP3). Mutaciones en PTEN alteran la señalización mediada por este segundo mensajero, afectando a procesos celulares como la apoptosis, el metabolismo o el crecimiento celular. En levaduras los niveles de PIP3 son indetectables, sin embargo, el gen PTEN es ubicuo en estos organismos. Nuestro grupo ha identificado un ortólogo de PTEN en la levadura Hansenula polymorpha, HpTep1, a través de un rastreo de mutantes afectados en la asimilación de nitrato. Los primeros trabajos realizados sobre Tep1 muestran que la cepa delecionada en TEP1 aumenta los niveles de PIP3, tiene menores niveles de expresión de los genes que regulan la vía de asimilación de nitrato y menor actividad nitrato reductasa. Este trabajo ha sido llevado a cabo para determinar si Tep1 está alterando el tráfico intracelular del transportador de nitrato de alta afinidad Ynt1 en H. polymorpha. La cepa Δtep1 mostró sensibilidad a análogos tóxicos de aminoácidos y mayores niveles de excreción de nitrito, resultados consistentes con la hipótesis de que el transportador Ynt1 se tuviese acumulando en la membrana plasmática. El análisis de los niveles de Ynt1 por Western-Blot confirmó esta hipótesis, sugiriendo que Tep1 tendría un papel importante en la regulación del tráfico intracelular de transportadores en levadura.es
dc.format.mimetypeapplication/pdfes_ES
dc.language.isoeses_ES
dc.rightsNo autorizo la publicación del documentoes_ES
dc.subjectFosfatidilinositol
dc.subjectLevadura
dc.subjectNitrato
dc.subjectPTEN
dc.titleImplicación de TEP1, homólogo del gen supresor de tumores PTEN en humanos, en la regulación del transportador de nitrato de alta afinidad Ynt1 en levadura.es_ES
dc.typeinfo:eu-repo/semantics/masterThesis


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