RT info:eu-repo/semantics/doctoralThesis
T1 Metabolitos secundarios con actividad antiparasitaria de actionobacterias de manglar de la la costa ecuatoriana.
A1 Cartuche Flores, Luis
K1 QUÍMICA DE PRODUCTOS NATURALES ORGÁNICOS
K1 BACTERIAS
K1 ALCALOIDES
K1 ENFERMEDADES INFECCIOSAS
AB la bioprospección de actinobacterias marinas aisladas del manglar del archipiélago deJambelí.La cepa identificada como PBLC04 e identificada preliminarmente por suscaracterísticas morfológicas como perteneciente al género Streptomyces, fueseleccionada para su estudio fitoquímico bajo un esquema de fraccionamientobioguiado, empleando Acanthamoeba castellanii como modelo biológico guía en base alas potentes actividades antiparasitarias y antiproliferativas que mostraban sus extractosiniciales. La identidad taxonómica de la cepa PBLC04 se confirmó mediante análisis desu secuencia genética (Genbank MK639686) y los estudios filogenéticos permitieronincluir a la cepa PBLC04 en un solo clado conteniendo la secuencia tipo 219820Streptomyces sanyensis.El escalado y fermentación de esta cepa en medio marino hasta un volumen de 30 litrospermitió obtener una biomasa de 12.64 g que representa un rendimiento del 0.042% p/v.Mediante un fraccionamiento bioguiado, empleando geles de filtración como SephadexLH-20, cromatografía flash en RP18 y gel de sílice, y HPLC permitió el aislamiento delos siguientes indolocarbazoles (ICZs): estaurosporina (STS), con un peso total de 134mg (1.06% p/p), 7-oxo-estaurosporina (7OSTS, 1.01 mg - 0.008%), 4’-desmetilamino-4’-oxo-estaurosporina (4’D4’OSTS, 1.13 mg - 0.009%) y streptocarbazol B (SCZ-B, 0.91mg – 0.007%), cuyas estructuras fueron determinadas mediante un exhaustivo análisisespectroscópico.Todos estos compuestos se evaluaron frente a las amebas Acanthamoeba castellaniiNeff, A. griffini, A. polyphaga y Naegleria fowlerii, así como frente a parásitoskinetoplástidos causantes de leishmaniasis y tripanosomiasis (Leishmaniaamazonensis, L. donovani y Trypanosoma cruzi). Los estudios realizados se describende manera amplia en cuatro artículos científicos publicados en diferentes revistasinternacionales de alto impacto donde se detallan sus mecanismos de acción,estableciendo correlaciones entre la actividad biológica observada y la estructuraquímica de los metabolitos.Este grupo de ICZs interacciona fuertemente con proteinquinasas (PKs), enzimasinvolucradas en el control del ciclo celular y otras funciones esenciales para lasupervivencia de los parásitos, lo que justifica las potentes actividades encontradas. Dela investigación realizada se desprende que el mecanismo de toxicidad observado paraAcanthamoeba castellani y Naegleria fowlerii está íntimamente relacionado con laactivación de mecanismos de muerte celular programada (PCD) sobre todo con losderivados STS y 7OSTS que presentaron una mayor capacidad amoebicida. Estosefectos se pudieron justificar por la posible formación de enlaces de hidrógeno en el sitioactivo de PKs. La funcionalización en el anillo de lactama y en el residuo glucosídicopresentes en STS y 7OSTS podrían forzar una conformación adecuada de los ICZs quefacilita una mayor interacción con las PKs. Este hecho justificaría que los derivadosminoritarios 4’D4’OSTS y SCZ-B así como los ICZs comerciales K252c (STS aglicona)y arcyriaflavin A (7OSTS aglicona) presenten una menor actividad antiparasitaria.Finalmente, los estudios sobre Leishmania y Trypanosoma ponen de manifiestotoxicidades selectivas. Así, los amastigotes de L. amazonensis fueron más sensibles a7OSTS que a STS. Además, 7OSTS generó daño mitocondrial sobre L. amazonensisque no fue observado en L. donovani y T. cruzi.En conclusión, se ha establecido una clara correlación entre las potentes actividadesantiparasitarias observadas y los elementos estructurales de los indolocarbazoles,poniendo de relieve este tipo de estructuras como cabezas de serie para el desarrollode futuros fármacos para el tratamiento de infecciones causadas por amebas ykinetoplástidos.
YR 2021
FD 2021
LK http://riull.ull.es/xmlui/handle/915/25777
UL http://riull.ull.es/xmlui/handle/915/25777
LA en
DS Repositorio institucional de la Universidad de La Laguna
RD 18-nov-2024