Elaboración de nanopartículas híbridas para la vectorización activa de oligonucleótidos.

Abstract

The discovery of genes involved in the regulation of bone regeneration together with theprogress of nanotechnology, can led to the development of gene therapy systems with specific vectorization to cellular targets using molecules such as aptamers or antibodies. In this work, the main objective was to obtain hybrid nanoparticles functionalized with an aptamer by surface adsorption able to present suitable physicochemical characteristics for their loading with antisense oligonucleotides for bone regenerative medicine. In this way, the influence of nanoparticles surface charge and aptamer- nanoparticles incubation conditions (ambient temperature for 1 hour, or 4ºC for 24 hours) on the adsorption efficiency of the aptamer was studied. Also, the modifications this adsorption produces on nanoparticles properties, specifically, size and Z potential was assessed. As result, an increase in the adsorption efficiency of the aptamer was observed with an increase in the positive surface charge of the nanoparticles, as well as an increase in the diameter and decrease of the Z potential at higher adsorption efficiency of the aptamer. No differences were observed in the adsorption efficiencies between both incubation conditions.

La identificación de genes implicados en la regulación de la regeneración ósea y el avance de la nanotecnología permiten desarrollar sistemas de terapia génica para su vectorización a dianas celulares específicas mediante el empleo de moléculas como aptámeros o anticuerpos. En este trabajo, el principal objetivo fue la obtención de nanopartículas híbridas funcionalizadas con un aptámero mediante adsorción superficial con características fisicoquímicas adecuadas para la incorporación de oligonucleótidos antisentido en medicina regenerativa ósea. Para ello, se estudió la influencia de la carga superficial de las nanopartículas y de las condiciones de incubación (temperatura ambiente durante 1 hora, o 4ºC durante 24 horas) sobre la eficiencia de adsorción del aptámero a la superficie de las nanopartículas, así como las modificaciones que esta adsorción produce sobre las propiedades de las mismas, en concreto, tamaño y potencial Z. Los resultados indicaron un incremento en la eficiencia de adsorción del aptámero a medida que aumenta la carga superficial positiva de las nanopartículas, así como un aumento del diámetro y disminución del potencial Z con el incremento de la eficiencia de adsorción del aptámero. No se observaron diferencias en la eficiencia de adsorción entre ambas condiciones de incubación.